宫颈癌细胞增殖和DNA倍体与放射敏感性的关系

为研究宫颈癌细胞增殖参数 S期比例 (SPF)、增殖指数 (PI)和 DNA倍体与宫颈癌放射敏感性的关系 ,探讨它们在预测宫颈癌放射敏感性中的价值。对 4 7例宫颈癌患者放疗前行宫颈癌组织取材 ,进行流式细胞术分析 ,在放疗过程中每周测量 1次宫颈局部瘤床的大小 ,计算肿瘤消退 1/ 2所需照射剂量 (D0 .5 ) ,研究 SPF、PI和 DNA倍体与D0 .5之间的关系。结果显示 :SPF与 D0 .5呈正相关 (r=0 .6 0 4 ,P<0 .0 1) ,PI与 D0 .5无明显关系 ,DNA倍体对 D0 .5的影响有显著性意义 (P<0 .0 5 )。提示 :宫颈癌细胞放疗前 SPF和 DNA倍体与放射敏感性有关 ,该两项指标有可能成为宫颈癌放射敏感性的预测指标     

系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞PD-L1的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血B淋巴细胞PD-L1的表达及其在SLE发病中的意义.方法 应用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测SLE患者外周血B淋巴细胞上PD-L1的表达水平.结果 活动期SLE患者外周血B淋巴细胞CD19 、CD19 /PD-L1 的表达水平明显高于SLE非活动期患者(P＜0.05)和正常对照组(P＜0.05).结论 活动期SLE患者B淋巴细胞的PD-L1表达异常增加,其可能在SLE发病机制中起重要作用.     

一种新的双向电泳蛋白样品制备方法

目的探讨双向凝胶电泳（2-DE）样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例，采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组，并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-DPAGE图谱的比较分析，发现采用8mol／L Urea，2mol／L Thiourea，4％CHAPS，1％NP-40.4％Triton X-100，65mmol／LDTT，0．5mmol／LPMSF，0．5％pharmalyte3-10，能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品，从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。     

胃肠道肿瘤发展过程中细胞竞争作用的研究

目的 研究细胞竞争在临床肿瘤病例发生发展中的作用及可能存在的机制.方法 收集手术切除的胃肠道肿瘤标本中的肿瘤组织细胞、肿瘤旁组织细胞及远离肿瘤的正常组织细胞,应用流式细胞术检测各部位细胞增殖与凋亡率,并用Western blot检测相应部位组织C-myc蛋白的表达水平.用统计学方法分析各组之间的差异.结果 肿瘤组织的细胞增殖水平明显高于瘤旁组织细胞的增殖水平,瘤旁组织细胞的凋亡率高于肿瘤细胞,也高于远处正常组织细胞.肿瘤组织的C-myc蛋白表达水平明显高于瘤旁组织.结论 肿瘤细胞与瘤旁组织的细胞存在细胞竞争,细胞竞争在肿瘤向周围浸润侵犯过程中起到重要作用.     

Cyclins非时相性表达和MDR1与胃肠道恶性肿瘤分期的研究

目的：研究胃肠道恶性肿瘤的4种主要Cyclins的表达规律，以此为依据对恶性肿瘤进行分型，并结合肿瘤标本中MDR1（多药耐药基因）的表达情况，与肿瘤TNM分期进行相关性研究。方法：使用流式细胞术分析新鲜手术获取的肿瘤标本的CyclinD1，E，A，B1及与MDR1表达情况，再记录术后病理报告进行TNM分期。结果：根据4种主要Cyclins的表达情况对恶性消化道肿瘤分为Ⅰ～Ⅳ型cyclin非时相性表达类型，此Ⅰ～Ⅳ型细胞周期类型与TNM分期有一致性（Kappa值为0．599，P〈0．01），Ⅰ～Ⅳ型细胞周期类型中MDR1的表达水平逐渐增高（Spearman相关系数0．495，P〈0．01）。结论：根据4种主要Cyclins（Cyclin D1，E，A，B1）的表达情况对胃肠肿瘤进行的分型具有与TNM分期相同的意义，可以说是对“分子分期”的一种探索。在消化道肿瘤中，MDR1与肿瘤细胞周期破坏类型有关，对治疗具有指导意义。     

胃肠道肿瘤细胞周期素A的表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的探讨胃肠道肿瘤细胞细胞周期素A（Cyclin A）的表达及其与肿瘤化疗敏感性之间的相关性。方法用流式细胞术双参数标记法对45例临床胃肠道肿瘤标本Cyclin A的表达进行检测，同时用四甲基偶氮唑盐显色法（MTT法）检测该肿瘤标本对几种常用化疗药物单药和联合用药方案的敏感程度。结果Cyclin A阳性表达的肿瘤细胞中对5-氟尿嘧啶（5-FU）、顺铂（DDP）、5-FU＋丝裂霉素（MMC）敏感的标本比例分别为76.9%、73.1%和84.6%；Cyclin A阴性表达的肿瘤细胞中相应的比例分别为15.8%、15.8%和10.5%，Cyclin A的表达与5-FU、DDP、5-FU＋MMC的药物敏感性之间具有相关性（均P〈0.01）。Cyclin A的表达与泰素（Taxol）、替尼泊苷（VM-26）、MMC、5-FU＋Taxol、5-FU＋DDP药物敏感性未发现有相关性（均P〉0.05）。结论Cyclin A的表达与某些肿瘤术后化疗方案的敏感程度显著相关，检测该指标对术后化疗药物和联合化疗方案选择可起到一定指导作用。     

原发骨肿瘤端粒酶活性的检测及临床意义

目的:探讨端粒酶在原发骨肿瘤组织中的活性表达及临床意义.方法:采用TRAP-ELISA法对21例骨肉瘤、11例骨巨细胞瘤、9例软骨肉瘤、3例骨恶性纤维组织细胞瘤、1例脊索瘤、11例骨软骨瘤、5例骨样骨瘤、4例非骨化性纤维瘤、6例孤立性骨囊肿及7例正常骨组织进行端粒酶活性检测.结果:45例原发恶性骨肿瘤中有38例显示端粒酶活性,阳性率为84.4%,26例良性病变组织中只有2例骨软骨瘤具端粒酶活性,7例正常组织端粒酶表达均为阴性.结论:恶性骨肿瘤组织中端粒酶活性明显高于良性病变和正常组织,有可能成为恶性骨肿瘤的一种潜在性生化标志物和鉴别诊断的指标.     

肠内营养合早期中药干预对胃大部切除大鼠肠道黏膜细胞更新状态的影响

目的探讨肠内营养合早期中药干预对胃大部切除大鼠肠道细胞更新状态指标(肠道黏膜细胞凋亡率)的影响及机制。方法将60只雄性SD大鼠建立胃大部切除模型,随机分成对照组(C),普通肠内营养组(EN组),肠内营养加四君子汤组(S-EN组)。从术后第1天起连续营养支持7 d,各组营养液的热量、含氮量均相同。观察术前1 d、术后1 d、3 d、7 d的肠道细胞更新状态指标(肠道黏膜细胞凋亡率)的变化。结果S-EN组术后3 d后肠道黏膜细胞凋亡率显著高于C组和EN组(P<0.05)。结论肠内营养合早期中药(四君子汤)干预可提高术后大鼠的营养状态和肠道细胞更新状态,明显改善肠黏膜屏障功能。     

运用流式细胞术对乳腺癌激素受体检测的研究

目的运用双参数流式细胞术检测临床乳腺癌新鲜标本单细胞悬液的雌孕激素受体的状态，同时结合DNA分析倍体和S期的比例判断乳腺癌患者的预后。方法获取手术切除的临床乳腺癌新鲜标本32例，制成单细胞悬液后，运用双参数流式细胞术检测雌孕激素受体的状态，并分析倍体情况和S期比例。结果(1)运用流式细胞术不仅能定性而且能定量检测临床标本的雌孕激素受体状态，且所需组织量少，这种方法比免疫组化的方法更敏感。(2)同时结合DNA，判断乳癌的倍体和S期的比例。结论流式细胞术检测激素受体更敏感、更具特异性，能更确切地指导临床医生的判断和治疗。     

流式细胞术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的方法研究

目的探讨cydin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的可行性、科学性和优越性，为肿瘤的细胞周期分析提供科学有效的技术支持。方法运用cydin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白的表达。并与传统的免疫组织化学切片法进行比较。结果流式细胞术可以准确地对细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达进行定性、定量、定位的分析，较为系统地反映了细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达特性和肿瘤的生物学特性。结论Cyclin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质分析技术和共聚焦显微镜技术是一种科学有效的检测临床实体瘤细胞周期破坏特性的技术和方法。